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      RNA
      2013-4-16  瀏覽量:5622

      RNA

      Christina Troiber, Julia C. Kasper, Silvia Milani, Max Scheible, Irene Martin, Frank Schaubhut, Sarah Küchler, Joachim Rädler, Friedrich C. Simmel, Wolfgang Friess and Ernst Wagner (2012) 比較四種不同用于siRNA復合物鑒定的粒子大小測量方法,European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics,可供網上下載 2012年10月15日。
      http://dx.doi.org/10.1016/j.ejpb.2012.08.014

      摘要
      能夠可靠地確定siRNA復合物大小是合理設計粒子和其配方,以及其在體內的安全應用的關鍵。目前沒有標準的大小測量技術。每種方法都有其不同的原理,因此,可能會得到不同的結果。在這研究中評定了四種同質和異質的siRNA復合物的適用性的分析方法:動態光散射(DLS),原子力顯微鏡(AFM),納米粒子追蹤分析(NTA)和熒光相關光譜(FCS)。

      本研究中使用了三種不同的siRNA各式復合組合物,產生自不同的,精確的和疏水性的修改了的oligoaminoamides。所有的被評定的方法是適合于中型,同質的siRNA復合物(?120 nm)分析。小的顆粒(<40nm)不能被NTA方法追蹤,但可被其它三種方法測量。異質復合物一般很難分析。只有原子力顯微鏡的可對異質復合物進行觀察。 FCS是唯一的方法,適合用于測量在90%牛胎兒血清中的復合物穩定性。復合物的物理化學特性在體內應用和未來的配方開發成功的重要質量標準。因此,由一個以上的方法組合而成的全面分析是由其重要的。


      Fig:NTA of 332 polyplexes in HEPES pH 7.4: A) 3D polt of relative intensity versus particle size; B) Microscope pictures of tracked particles.

       

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